遺伝子合成は、DNAクローニングの代替に留まらず、幅広いアプリケーションでご活用されています。
1. ご計画の実験に合わせたベクター改変・合成・構築のサポートも可能です。
1-1. ベクター改変のサポート
遺伝子合成＋サブクローニングの組合せサービスで対応いたします。
ベクターの
複製起点を変更したい
タグを変更したい
MCSを導入したい
薬剤耐性を変更したい
プロモーターを変更したい
1-2. ベクター構築の例
弊社の標準ベクターpUC系をバックボーンに、動物細胞系での一過性発現ベクター(pCEC2.1)を構築
【発現確認】
Expi293細胞、PEI Maxによるトランスフェクション
DNA 1 ugに対してPEI Maxを4 ul (4 ug) 使用しトランスフェクション24時間後に観察
【挿入配列】
EGFP cDNA + KOZAK配列も合成
【HEK293においてEGFPの発現をpcDNA3.1とpCEC2.1で比較検討】
pCEC2.1-EGFPから制限酵素にてEGFPを切り出しpcDNA3.1へ挿入して、規準とするpcDNA3.1-EGFPを作製。
このpcDNA3.1-EGFPとpCEC2.1-EGFPをHEK293T細胞へトランスフェクションし、EGFPの蛍光を観察した結果、蛍光顕微鏡下での観察では、明らかにpCEC2.1-EGFPの方が明るい像が観察された。
続いて、プレートリーダーにて蛍光強度の測定を行ったところ、pCEC2.1-EGFPはpcDNA3.1-EGFPと比べて約1.78倍の蛍光強度を示した。
HEK293T細胞においては、pCEC2.1ベクターの優位性を示せた。
ご希望の方にはpCEC2.1へサブクローニングしてお届けいたします。
ご注文方法
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2. 混合塩基Nを含んだ変異ライブラリー構築は、組換え体スクリーニングを加速します。
例えば、改変したい抗体遺伝子領域において混合塩基Nを含んだ変異ライブラリーを合成し、その発現をスクリーングします。ヒットしたクローンの配列をシーケンスすることで目的改変物が速やかに得られます。
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3. 無細胞タンパク質合成系と組合わせることで、簡便かつ迅速なタンパク質合成の実現が可能！
ゲノムワイドなタンパク質の機能・構造解析のハイスループット性を加速します。
M : マーカー
C : コントロール
1～11 : サンプル
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変異ライブラリー構築はじめ、多様なアプリケーションにお応えします。
お気軽にご相談ください。
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配列デザインなどについては担当者までお気軽にご相談ください。
ユーロフィンジェノミクス株式会社
人工遺伝子合成サービス
E-mail gsy-jp@eurofins.com
TEL 03-6631-0102
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