実験原理
サンプルQC
Agilent社TapeStation及びThermo Fisher Scientific社Qubitを用いて分解の有無、核酸量をチェックします。
ライブラリ調製
以下のライブラリ調製を行います。
- ゲノムショットガンライブラリ：DNAを断片化、サイズセレクション、アダプターの付加を行います。
- Strand-Specific mRNAライブラリ：RNAよりmRNAを精製（もしくはrRNAを枯渇）、断片化、cDNA合成、アダプターの付加を行います。
クラスタリング
Flow Cell上にライブラリDNAを結合させ、Bridge PCRによりクラスタを形成します。
シーケンシング
Sequence by Synthesis法により、1塩基ずつ伸長反応を行います。各伸長反応ごとに画像を取得し、画像情報から塩基配列を決定します。
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